- English
- 简体中文
- Esperanto
- Afrikaans
- Català
- שפה עברית
- Cymraeg
- Galego
- 繁体中文
- Latviešu
- icelandic
- ייִדיש
- беларускі
- Hrvatski
- Kreyòl ayisyen
- Shqiptar
- Malti
- lugha ya Kiswahili
- አማርኛ
- Bosanski
- Frysk
- ភាសាខ្មែរ
- ქართული
- ગુજરાતી
- Hausa
- Кыргыз тили
- ಕನ್ನಡ
- Corsa
- Kurdî
- മലയാളം
- Maori
- Монгол хэл
- Hmong
- IsiXhosa
- Zulu
- Punjabi
- پښتو
- Chichewa
- Samoa
- Sesotho
- සිංහල
- Gàidhlig
- Cebuano
- Somali
- Тоҷикӣ
- O'zbek
- Hawaiian
- سنڌي
- Shinra
- Հայերեն
- Igbo
- Sundanese
- Lëtzebuergesch
- Malagasy
- Yoruba
- Español
- Português
- русский
- Français
- 日本語
- Deutsch
- tiếng Việt
- Italiano
- Nederlands
- ภาษาไทย
- Polski
- 한국어
- Svenska
- magyar
- Malay
- বাংলা ভাষার
- Dansk
- Suomi
- हिन्दी
- Pilipino
- Türkçe
- Gaeilge
- العربية
- Indonesia
- Norsk
- تمل
- český
- ελληνικά
- український
- Javanese
- فارسی
- தமிழ்
- తెలుగు
- नेपाली
- Burmese
- български
- ລາວ
- Latine
- Қазақша
- Euskal
- Azərbaycan
- Slovenský jazyk
- Македонски
- Lietuvos
- Eesti Keel
- Română
- Slovenski
- मराठी
- Srpski језик
რა ფუნქციები აქვს ELISA ნაკრების?
2022-12-23
ELISA ნაკრები ეფუძნება ანტიგენის ან ანტისხეულის მყარ ფაზას და ანტიგენის ან ანტისხეულის ფერმენტულ მარკირებას. მყარი მატარებლის ზედაპირზე შეკრული ანტიგენი ან ანტისხეული კვლავ ინარჩუნებს თავის იმუნოლოგიურ აქტივობას, ხოლო ფერმენტის მარკირებული ანტიგენი ან ანტისხეული ინარჩუნებს თავის იმუნოლოგიურ აქტივობას და ფერმენტის აქტივობას. განსაზღვრის დროს, ტესტის ქვეშ მყოფი ნიმუში (რომელშიც იზომება ანტისხეული ან ანტიგენი) რეაგირებს ანტიგენთან ან ანტისხეულთან მყარი მატარებლის ზედაპირზე. მყარ მატარებელზე წარმოქმნილი ანტიგენ-ანტისხეულის კომპლექსი გამოყოფილია სითხეში შემავალი სხვა ნივთიერებებისგან გარეცხვით.
ემატება ფერმენტებით მონიშნული ანტიგენები ან ანტისხეულები, რომლებიც ასევე უკავშირდებიან მყარ მატარებელს რეაქციით. ამ დროს, ფერმენტის რაოდენობა მყარ ფაზაში პროპორციულია ნიმუშში არსებული ნივთიერების რაოდენობასთან. ფერმენტული რეაქციის სუბსტრატის დამატების შემდეგ, სუბსტრატი ფერმენტის მიერ კატალიზებულია და ხდება ფერადი პროდუქტები. პროდუქტის რაოდენობა პირდაპირ კავშირშია სინჯში შემოწმებული ნივთიერების რაოდენობასთან, ამიტომ ხარისხობრივი ან რაოდენობრივი ანალიზი შეიძლება ჩატარდეს ფერის სიღრმის მიხედვით.
ფერმენტების მაღალი კატალიზური ეფექტურობა ირიბად აძლიერებს იმუნური პასუხის შედეგებს, რაც ანალიზს უაღრესად მგრძნობიარე ხდის. ELISA შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანტიგენების დასადგენად, მაგრამ ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანტისხეულების დასადგენად.
ELISA ნაკრების ძირითადი პრინციპები
იგი იყენებს ანტიგენისა და ანტისხეულების სპეციფიკურ რეაქციას ობიექტის ფერმენტთან დასაკავშირებლად, შემდეგ კი წარმოქმნის ფერთა რეაქციას ფერმენტსა და სუბსტრატს შორის რაოდენობრივი განსაზღვრისთვის. გაზომვის ობიექტი შეიძლება იყოს ანტისხეული ან ანტიგენი.
განსაზღვრის ამ მეთოდში აუცილებელია სამი რეაგენტი:
მყარი ფაზის ანტიგენი ან ანტისხეული (იმუნური ადსორბენტი)
â¡ ფერმენტის ეტიკეტირებული ანტიგენი ან ანტისხეული (მარკერი)
¢ ფერმენტის მოქმედების სუბსტრატი (ფერის განვითარების საშუალება)
გაზომვისას, ანტიგენი (ანტისხეული) ჯერ უკავშირდება მყარ მატარებელს, მაგრამ მაინც ინარჩუნებს თავის იმუნურ აქტივობას, შემდეგ კი ემატება ანტისხეულის (ანტიგენის) და ფერმენტის კონიუგატი (მარკერი), რომელიც კვლავ ინარჩუნებს თავდაპირველ იმუნურ აქტივობას და ფერმენტს. აქტივობა. როდესაც კონიუგატი რეაგირებს ანტიგენთან (ანტისხეულთან) მყარ მატარებელზე, ემატება ფერმენტის შესაბამისი სუბსტრატი. ანუ კატალიზური ჰიდროლიზი ანუ REDOX რეაქცია და ფერი.
ემატება ფერმენტებით მონიშნული ანტიგენები ან ანტისხეულები, რომლებიც ასევე უკავშირდებიან მყარ მატარებელს რეაქციით. ამ დროს, ფერმენტის რაოდენობა მყარ ფაზაში პროპორციულია ნიმუშში არსებული ნივთიერების რაოდენობასთან. ფერმენტული რეაქციის სუბსტრატის დამატების შემდეგ, სუბსტრატი ფერმენტის მიერ კატალიზებულია და ხდება ფერადი პროდუქტები. პროდუქტის რაოდენობა პირდაპირ კავშირშია სინჯში შემოწმებული ნივთიერების რაოდენობასთან, ამიტომ ხარისხობრივი ან რაოდენობრივი ანალიზი შეიძლება ჩატარდეს ფერის სიღრმის მიხედვით.
ფერმენტების მაღალი კატალიზური ეფექტურობა ირიბად აძლიერებს იმუნური პასუხის შედეგებს, რაც ანალიზს უაღრესად მგრძნობიარე ხდის. ELISA შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანტიგენების დასადგენად, მაგრამ ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანტისხეულების დასადგენად.
ELISA ნაკრების ძირითადი პრინციპები
იგი იყენებს ანტიგენისა და ანტისხეულების სპეციფიკურ რეაქციას ობიექტის ფერმენტთან დასაკავშირებლად, შემდეგ კი წარმოქმნის ფერთა რეაქციას ფერმენტსა და სუბსტრატს შორის რაოდენობრივი განსაზღვრისთვის. გაზომვის ობიექტი შეიძლება იყოს ანტისხეული ან ანტიგენი.
განსაზღვრის ამ მეთოდში აუცილებელია სამი რეაგენტი:
მყარი ფაზის ანტიგენი ან ანტისხეული (იმუნური ადსორბენტი)
â¡ ფერმენტის ეტიკეტირებული ანტიგენი ან ანტისხეული (მარკერი)
¢ ფერმენტის მოქმედების სუბსტრატი (ფერის განვითარების საშუალება)
გაზომვისას, ანტიგენი (ანტისხეული) ჯერ უკავშირდება მყარ მატარებელს, მაგრამ მაინც ინარჩუნებს თავის იმუნურ აქტივობას, შემდეგ კი ემატება ანტისხეულის (ანტიგენის) და ფერმენტის კონიუგატი (მარკერი), რომელიც კვლავ ინარჩუნებს თავდაპირველ იმუნურ აქტივობას და ფერმენტს. აქტივობა. როდესაც კონიუგატი რეაგირებს ანტიგენთან (ანტისხეულთან) მყარ მატარებელზე, ემატება ფერმენტის შესაბამისი სუბსტრატი. ანუ კატალიზური ჰიდროლიზი ანუ REDOX რეაქცია და ფერი.
მისი წარმოქმნილი ფერის ჩრდილი პროპორციულია გასაზომი ანტიგენის (ანტისხეულის) რაოდენობისა. ამ ფერადი პროდუქტის დაკვირვება შესაძლებელია შეუიარაღებელი თვალით, ოპტიკური მიკროსკოპით, ელექტრონული მიკროსკოპით, ასევე შეიძლება გაზომოს სპექტროფოტომეტრით (ფერმენტული ეტიკეტის ინსტრუმენტი). მეთოდი არის მარტივი, მოსახერხებელი, სწრაფი და სპეციფიკური.
