> ბლოგი > ინდუსტრიის სიახლეები

რატომ ასუფთავებს უჯრედული კულტურა პირველ რიგში სისხლის წითელ უჯრედებს?

2022-12-23

ძირითადი შესავალი
ერითროციტების ლიზატი არის ერთ-ერთი ყველაზე მარტივი და მარტივი მეთოდი სისხლის წითელი უჯრედების მოსაშორებლად, ანუ სისხლის წითელი უჯრედების გაყოფა ლიზატით, რომელიც არ აზიანებს ბირთვულ უჯრედებს და შეუძლია სრულად ამოიღოს სისხლის წითელი უჯრედები. ლიზატის დაშლა არის სისხლის წითელი უჯრედების მოცილების მსუბუქი მეთოდი, რომელიც ძირითადად გამოიყენება ფერმენტის მონელების შედეგად დაშლილი ქსოვილის უჯრედების გამოყოფისა და გასაწმენდად, ლიმფოციტების გამოყოფისა და გაწმენდისთვის და სისხლის წითელი უჯრედების მოცილებისთვის ქსოვილის პროტეინისა და ნუკლეინის ექსპერიმენტებში. მჟავის მოპოვება. სისხლის წითელი უჯრედების ლიზატით მიღებული ქსოვილის უჯრედები არ შეიცავს სისხლის წითელ უჯრედებს და შეიძლება გამოყენებულ იქნას პირველადი კულტურის, უჯრედების შერწყმის, ნაკადის ციტომეტრიისთვის, ნუკლეინის მჟავისა და ცილის გამოყოფისა და ექსტრაქციისთვის და ა.შ.

Ინსტრუქცია გამოსაყენებლად
ქსოვილის უჯრედის ნიმუში
1. ახალი ქსოვილები დაიჯესტილა პანკრეასის/ფერმენტის ან კოლაგენაზას მიერ და დაიშალა ერთუჯრედოვან სუსპენზიაში, ხოლო სუპერნატანტი განადგურდა ცენტრიფუგირებით.

2. აიღეთ ELS ლიზატი მაცივრიდან 4 ტემპერატურაზე, დაამატეთ ELS ლიზატი უჯრედულ ნალექს თანაფარდობით 1:3-5 (დაამატეთ 3-5 მლ ლიზატი 1 მლ დატკეპნილ უჯრედს), ნაზად ააფეთქეთ და აურიეთ.

3. ცენტრიფუგა 800-1000 rpm-ზე 5-8 წუთის განმავლობაში და გადააგდეთ ზედა წითელი გამჭვირვალე სითხე.

4. დალექილი ნაწილი შეგროვდა და ცენტრიფუგირებულ იქნა ჰენკის ხსნარით ან შრატისგან თავისუფალი კულტურის ხსნარით 2-3-ჯერ.

5, თუ ბზარი არ არის დასრულებული/დასრულებულია, შეიძლება განმეორდეს 2 და 3 ნაბიჯები.

6. რეზუსპენზიის უჯრედები შემდგომი ექსპერიმენტებისთვის; თუ რნმ ამოღებულია, უმჯობესია ამის გაკეთება მე-4 საფეხურიდან მომზადებულ ხსნარში DEPC წყლის გამოყენებით

სისხლის წითელ უჯრედებს აქვთ ძალიან მოკლე სასიცოცხლო ციკლი, მხოლოდ 120 დღე, მაგრამ ისინი ძალიან სწრაფად ამრავლებენ სისხლს და ამ შემთხვევაში მათ განსაკუთრებით შეუძლიათ უჯრედების გაყოფა და ისინი ყველაზე სწრაფად გამყოფი უჯრედებია, ამიტომ ეს უჯრედი ძალიან ღირებულია. ასე რომ, ის ძალიან სასარგებლოა უჯრედების კულტურისთვის. ეს ძალიან მარტივია, მასში არ არის ორგანელები, მხოლოდ უჯრედის მემბრანა და ცილები.

წინა:რა ფუნქციები აქვს ELISA ნაკრების?

შემდეგი:რეაგენტის მოთხოვნები და ხსნარის კონცენტრაციის ძირითადი წარმოდგენა.